紫外可見分光光度計對于分析人員來說是最有用的分析工具之一,幾乎每一個分析實驗室都離不開紫外可見分光光度計,在食品檢測中也是如此,可以用來進行食品的多種成分分析和檢測,應(yīng)用十分廣泛。紫外可見分光光度法是利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進行分析的一種儀器分析方法。這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價電子和分子軌道上的電子在電子能級間的躍遷,它廣泛應(yīng)用于無機和有機物質(zhì)的定性和定量分析。
朗伯一比耳定律(lamber- beer)是光吸收的基本定律,俗稱光吸收定律,是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。當(dāng)入射光波長一定時,溶液的吸光度A 是吸光物質(zhì)的濃度C 及吸收介質(zhì)厚度I(吸收光程)的函數(shù)。在國際上發(fā)表的有關(guān)分析的論文中,光度法約占28%。由于各種各樣的無機物和有機物在紫外- 可見區(qū)域都有吸收,因此均可借此方法加以測定。在食品行業(yè),紫外可見分光光度計被廣泛應(yīng)用于食品檢測之中。紫外可見分光光度計價格相對低廉,分析成本低,在使用過程中儀器幾乎沒有什么耗損。食品企業(yè)大多屬于中小企業(yè),規(guī)模不大且利潤薄,降低食品檢測費用尤為重要,用紫外可見分光光度計作為主要檢測儀器可以大大降低企業(yè)檢測成本。DNA/ 蛋白質(zhì)為生物大分子,所產(chǎn)生的紫外光吸收往往是其分子內(nèi)的小基團所引起的,例如嘌呤堿、嘧啶堿、酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和肽鍵等。嘌呤堿、嘧啶堿以及由它們參與組成的核苷、核苷酸及核酸對紫外光有強烈的吸收,在吸收波長260 nm 處有最大吸收值。在蛋白質(zhì)分子中,酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)殘基的苯環(huán)含有共扼雙鍵,該共扼雙鍵對紫外光有吸收(其中最大吸收Tyr 在吸收波長274 nm 處;Phe 在吸收波長257 nm 處;Trp 在吸收波長280 nm 處),從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)對紫外光有吸收。肽鍵對紫外光的最大吸收在吸收波長238 nm 處。利用這個特性可以準確、可靠地測定乳制品中蛋白質(zhì)含量。
總之,紫外可見分光光度計基本可以滿足廣大中小食品企業(yè)食品檢測分析的需要。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,紫外可見分光光度計還可和其他分析儀器聯(lián)機,使其應(yīng)用范圍更加廣泛,能在更多的領(lǐng)域發(fā)揮作用。
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