紫外分光光度計(jì)介紹（二）

紫外分光光度計(jì)分為單波長(zhǎng)及雙波長(zhǎng)兩大類，其中單波長(zhǎng)分光光度計(jì)，又可分為單光束和雙光束兩類。下面繼續(xù)介紹各類光度計(jì)。

單波長(zhǎng)單光束紫外分光光度計(jì)：

   單波長(zhǎng)單光束分光光度計(jì)是分光光度計(jì)中光路設(shè)計(jì)最簡(jiǎn)單的一種，它只有一條光束，通過變換參比和樣品的位置，使其分別進(jìn)入光路。在參比進(jìn)入光路時(shí)，調(diào)零。然后將樣品移進(jìn)光路，樣品信號(hào)自動(dòng)減去參比信號(hào)，就可在電流表上或數(shù)字顯示器上讀出樣品的透光度或吸光度。單波長(zhǎng)單光束儀器的單色器，有用棱鏡的，也有用光柵的。

單波長(zhǎng)雙光束紫外分光光度計(jì)

   單波長(zhǎng)雙光束紫外分光光度計(jì)，是近30年來開發(fā)的一種分光光度計(jì)。雙光束就是在同一儀器中使用了兩個(gè)完全相同的光束。這兩個(gè)光束同時(shí)分別地通過參比溶液和待測(cè)溶液，以測(cè)量它們的透光度之差。

   這種分光光度計(jì)由于采用雙光路方法，因此測(cè)定程序大為簡(jiǎn)化，即可直接讀數(shù)，又可掃描吸收光譜，還可以增加附件，擴(kuò)展儀器的使用范圍。此外，雙光束方法還可以排除由于光強(qiáng)度不穩(wěn)定而引入的誤差。

   雙光束儀器型號(hào)較多，按其結(jié)構(gòu)、性能、使用及應(yīng)用新技術(shù)的情況，可分為低、中、高檔儀器。低中檔儀器可作為一般測(cè)定，使用方便，例如上海光譜SP-1901，高檔雙光束儀器都是利用微機(jī)操作和數(shù)據(jù)處理。上海光譜SP-1900、上海光譜SP-1920、上海光譜SP-2500便屬于此類。

雙波長(zhǎng)雙光束紫外分光光度計(jì)：

   雙波長(zhǎng)儀器主要測(cè)定渾濁樣品。渾濁樣品溶質(zhì)顆粒造成的光散射，使表觀吸光度增加，甚至引起光譜畸變。為了探索測(cè)定渾濁樣品的方法，1951年Chance實(shí)驗(yàn)室巧妙的利用樣品在峰位和峰谷的吸光度之差，準(zhǔn)確的測(cè)定了樣品的真實(shí)吸光度，設(shè)計(jì)了第一臺(tái)雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)。

   隨著技術(shù)的發(fā)展，雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)常常同時(shí)可做雙光束測(cè)定。測(cè)定時(shí)，一個(gè)單色器被光閘關(guān)掉，另一單色器的光束由斬波器分成兩路，進(jìn)行雙光束測(cè)定。

   由于雙波長(zhǎng)雙光束儀器是把兩個(gè)不同波長(zhǎng)的單色光，通過同一樣品后照射到同個(gè)檢測(cè)器上。因此，它提供了單位時(shí)間內(nèi)來自兩個(gè)波長(zhǎng)的信號(hào)。記錄了兩個(gè)不同波長(zhǎng)的光吸收差，從而能對(duì)樣品進(jìn)行精確地測(cè)定，或跟蹤樣品隨時(shí)間發(fā)生的變化。