分光光度計原理:在有關(guān)分光光度法的教學(xué)實驗中,教學(xué)環(huán)節(jié)從介紹分光光度計原理人手,能起到舉一反三的效果。但應(yīng)注意的是在教學(xué)中不應(yīng)過多介紹Beer—Lambert光吸收定律及推 導(dǎo)公式,重點在于分光光度計的組成和應(yīng)用。尤其是對物理、化學(xué)基礎(chǔ)較差的學(xué)生,過多的公式推導(dǎo)容易讓學(xué)生產(chǎn)生深奧感而排斥學(xué)習(xí)。各種型號的紫外可見光分光光度計,不論何種形式 ,基本上都由五部分組成:光源、單色器、樣品、接受檢測放大系統(tǒng)、顯示或記錄器。 前三部分構(gòu)成光學(xué)系統(tǒng),后兩部分構(gòu)成電學(xué)系統(tǒng)。 兩個系統(tǒng)的組合把物質(zhì)的光吸收變化轉(zhuǎn)變成電流變化,從而定量分析物質(zhì)的含量。
光源:分為可見分光光度計和紫外可見分光光度計,前者用鎢燈,使用波長范圍350nm-1000nm,后者用氘燈,使用波長范圍是195-1100nm
單色器:是可見分光光度計的心臟部分,它的作用是把來自光源的混合光分解為單色光,并能通過調(diào)節(jié)波長選擇所需入射光路中單色光的波長。單色器中核心元件—— 色散元件也已從棱鏡向光柵等更精密的元件過渡。波長的選擇和單色光質(zhì)量是分光光度法測量精確度的關(guān)鍵。
樣品室:是放置待測樣品的位置。 待測樣品一般盛在吸收池內(nèi)(即比色杯)。比色杯有普通 光學(xué)玻璃和石英玻璃杯兩種。 前者由于吸收紫外光,只能用于可見光 波長測定,適用波長范 圍是400~2000nm。后者可透過紫外光、可見光和紅外光,適用波長范圍是180—3000nm。
接受檢測放大系統(tǒng):是接收透過比色杯的光強,并以電信號顯示出來,主要元件是光電轉(zhuǎn)換設(shè)備。常用的檢測器已從最初的光電管、光電信增管、光電二極管等轉(zhuǎn)換為電荷耦合器件(CCD)等,從而有更強的光電轉(zhuǎn)換效果。
顯示裝置:是將光吸收值顯示出來,早期是以電流表顯示,現(xiàn)已逐漸用數(shù)顯或計算機等所替代,從而減少讀數(shù)誤差。